鸭疫里默氏杆菌AS87-01740基因生物信息学分析及其原核表达

• 作者: 于圣青 何晶 单敏 李文海 李涛 王小兰 罗荣廷
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 鸭疫里默氏杆菌 AS87-01740基因 生物信息学 原核表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产·蚕桑
• 页码范围: 2058-2063
• 页数: 6页
• 分类号: S852.612
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2017.11.22

摘要

[目的]了解鸭疫里默氏杆菌AS87-01740基因分子生物学特性,确定其编码蛋白抗原性,为鸭疫里默氏杆菌亚单位疫苗研发提供新的靶标抗原选择.[方法]采用PCR克隆鸭疫里默氏杆菌AS87-01740基因,以DNASTAR和NCBI数据库分别进行基因生物信息学分析;利用pCold-TF原核表达载体在大肠杆菌BL21感受态细胞中进行诱导表达,并分别以SDS-PAGE和Western blotting检测融合蛋白的表达形式及其抗原特异性.[结果]从鸭疫里默氏杆菌基因组扩增获得的AS87-01740基因编码框全长618 bp,编码205个氨基酸,理论分子量约21.87 kD,理论等电点(pI)8.2,正电荷氨基酸总数17个,负电荷氨基酸总数16个.AS87-01740蛋白序列在同种属分离株中,与2型血清型分离株(11845、YM、GD和CH-2)有很高的相似性(>99%),与1型血清型分离株(CH-1和CH-3)的相似性为92%;在不同种属中,与金黄杆菌(Chryseobacterium sp.)、动物溃疡伯格菌(Bergeyella zoohelcum)和脑膜炎败血伊丽莎白菌(Elizabeth-kingia meningosepticum)的相似性分别为61%、60%和57%.经异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达获得的融合蛋白分子量约77 kD,以可溶性表达形式为主.Western blotting检测结果表明,融合蛋白能与鸭疫里默氏杆菌阳性血清发生特异性免疫反应.[结论]AS87-01740基因编码蛋白在不同鸭疫里默氏杆菌分离株中具有很高的保守性,且能与其阳性血清发生特异性免疫反应,是研发鸭疫里默氏杆菌疫苗的潜在抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于圣青	中国农业科学院上海兽医研究所	53	286	9.0	14.0
2	李涛	中国农业科学院上海兽医研究所	43	813	13.0	28.0
3	王小兰	中国农业科学院上海兽医研究所	14	92	5.0	9.0
4	单敏	广西大学动物科学技术学院	3	1	1.0	1.0
8	何晶	中国农业科学院上海兽医研究所	1	0	0.0	0.0
9	李文海	中国农业科学院上海兽医研究所	1	0	0.0	0.0
10	罗荣廷	广西大学动物科学技术学院	1	0	0.0	0.0