人心肌肌钙蛋白I的原核表达与纯化

• 作者: 刘磊 孙牧男 方艳秋 许淑芬 谭岩
• 来源期刊: 中国实验诊断学
• 学科: 生物学
• 关键词: 人心肌肌钙蛋白I 原核表达 镍凝胶亲和层析
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 358-361
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2641字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4287.2010.03.014

摘要

目的 构建人心肌肌钙蛋白I(human cardiac troponin I,hcTnI)原核表达载体并表达、分离纯化重组蛋白.方法 RT-PCR从人心肌组织中克隆出hcTnI的cDNA序列构建到原核表达载体pQE30,获得重组表达质粒pQE30-hcTnI,并在大肠杆菌M15中诱导表达.镍凝胶亲和层析纯化目的蛋白,Western Blot杂交鉴定重组蛋白.结果 经测序证实,获得的目的基因与(GeneBank M64247) 公布的hcTnI基因序列一致.pQE30-hcTnI在大肠杆菌M15中经IPTG诱导后表达出相对分子量约为29 kD的目的蛋白,镍柱纯化后经抗 hcTnI单克隆抗体进行Western印记,在相对分子量约29 kD处可见特异性着色带.结论 体外成功诱导了重组hcTnI蛋白表达,通过镍凝胶亲和层析法获得纯度较高的hcTnI蛋白,为进一步获得hcTnI的抗体及建立相应的临床快速检测方法奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘磊	吉林大学第一医院中心实验室	211	1231	18.0	25.0
2	谭岩	吉林大学第一医院中心实验室	135	608	9.0	17.0
3	方艳秋	吉林大学第一医院中心实验室	76	250	7.0	11.0
4	许淑芬	吉林大学第一医院中心实验室	37	200	6.0	13.0
5	孙牧男	吉林大学第一医院中心实验室	4	2	1.0	1.0