小鼠黑质双向凝胶电泳技术的优化

• 作者: 万金城 周长青 彭国光 陈莹 马英 龙汉春
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 医学
• 关键词: 黑质 双向电泳 蛋白质组学
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 178-181,185
• 分类号: R3
• 字数: 3574字
• 语种: 中文

摘要

为了优化小鼠黑质双向凝胶电泳(2-DE)技术,比较了不同样品预处理方法、不同胶条和不同上样量对凝胶电泳结果的影响.研究发现,两种样品预处理方法均可顺利升至最高等电聚焦(IEF)电压(10 000 V).与Clean-up kit法相比,TAC/丙酮沉淀法预处理后蛋白得率较低,同时丢失了样品中的部分中、小分子蛋白质.pH3-10 L胶条中蛋白点主要分布在中间区域;pH3-10 NL胶条对中间区域的蛋白点的分离有所改善;pH4-7胶条中蛋白点分布均匀,横条纹较少.80μg上样量的图谱背景干净,但点数最少(411);180μg上样量的图谱蛋白点较多(883),且圆润、清晰,背景干净,分辨率高;300μg上样量的图谱蛋白点虽然最多(904),但背景较深,部分蛋白点融合,横条纹也较多.研究表明,对于小鼠黑质蛋白质,使用Clean-up kit法对样品进行预处理,选取pH4-7的胶条,采用180μg的上样量能获得背景干净、分辨率高的双向电泳图谱,为帕金森病的生物标志物和药物靶点的研究打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭国光	重庆医科大学附属第一医院神经内科	98	623	12.0	19.0
2	陈莹	重庆医科大学附属第一医院神经内科	22	126	6.0	10.0
3	马英	重庆医科大学附属第一医院神经内科	26	251	10.0	15.0
4	万金城	重庆医科大学附属第一医院神经内科	11	53	6.0	7.0
5	周长青	重庆医科大学附属第一医院神经内科	11	57	6.0	7.0
6	龙汉春	重庆医科大学附属第一医院神经内科	5	15	2.0	3.0