人可诱导的共刺激分子转基因细胞的构建及其对B细胞产生抗体的影响

• 作者: 刘彤 孙静 张学光 王凤鸣
• 来源期刊: 苏州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 可诱导的共刺激分子 逆转录病毒 稳定表达 基因转染
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 457-460,469
• 分类号: R395.13
• 语种: 中文

摘要

目的 构建含人可诱导共刺激分子(ICOS)基因的重组逆转录病毒载体,获得稳定表达人ICOS基因的L929细胞株,并初步研究ICOS对B细胞产生抗体的影响.方法 采用RT-PCR方法从扁桃体激活的T细胞总RNA中扩增出ICOS cDNA,双酶切装入逆转录病毒载体pGEZ-Term,与辅助病毒载体脂质体法共转染包装细胞293T,用其培养上清感染L929细胞72 h后,经Zeocin筛选出稳定表达ICOS分子的L929细胞株;采用RT-PCR和流式细胞仪分析ICOS的分子表达,ELISA法研究ICOS信号对B细胞体外产生抗体的作用.结果 成功地构建了含ICOS基因的重组逆转录病毒载体;筛选获得能稳定高表达人ICOS分子的L929转基因细胞,ICOS在PWM体外培养体系中,能有效地促进B细胞生长及IgG的分泌.结论 ICOS是CD28家族的新成员,在机体免疫应答过程中起着重要的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张学光	苏州大学医学生物技术研究所	399	1957	18.0	24.0
2	孙静	苏州大学医学生物技术研究所	47	238	10.0	13.0
3	王凤鸣	苏州大学医学生物技术研究所	14	33	3.0	5.0
4	刘彤		7	3	1.0	1.0