共刺激分子配体B7-DC基因真核表达载体和转基因细胞的构建

• 作者: 刘进 孙强 岳挺 曹慧 李厚达 章蓉 董娟
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 共刺激分子 B7-DC 真核表达
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 933-936
• 页数: 4页
• 分类号: R392-33
• 字数: 3229字
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆小鼠B7-DC基因,并构建含该基因的真核表达载体pEF6/-B7-DG-V5His,证明该基因在CHO细胞中的表达方式,为建立B7-DC的转基因小鼠打下基础.方法:从小鼠胸腺中抽提总RNA为模板,通过RT-PCR技术,扩增出B7-DC编码区片段.按常规方法克隆进pEF6V5His载体中,重组质粒经鉴定后采用脂质体法转染CHO细胞,48小时后进行间接免疫荧光实验,72小时后用blasticidin进行筛选,挑选出能稳定表达B7-DC的细胞株.结果:已成功克隆小鼠B7-DC基因并构建了用于表达B7-DC基因的真核表达载体,经间接免疫荧光实验(IFA)证明,该基因在CHO细胞中得到表达.经Western blot检测表明筛选出的转基因细胞稳定表达了B7-DC基因.结论:构建了用于表达B7-DC基因的真核表达载体pEF6/-B7-DC-V5His,并能在CHO细胞中稳定表达目的基因,为该基因功能的后续研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙强	扬州大学兽医学院	39	202	8.0	12.0
3	李厚达	扬州大学兽医学院	89	740	16.0	21.0
6	曹慧	扬州大学兽医学院	5	5	1.0	2.0
7	岳挺	扬州大学兽医学院	4	11	2.0	3.0
8	董娟	扬州大学兽医学院	4	11	2.0	3.0
9	章蓉	扬州大学兽医学院	4	11	1.0	3.0
11	刘进	扬州大学兽医学院	5	10	2.0	3.0