脂质体法和电穿孔法体外转染SD大鼠视网膜Müller细胞的比较

• 作者: 刘曾琦 夏晓波
• 来源期刊: 国际眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脂转染 电穿孔 基因转染 视网膜Müller细胞 增强型绿色荧光蛋白基因
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 实验论著
• 页码范围: 247-249
• 页数: 3页
• 分类号: R77
• 字数: 4300字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5123.2010.02.015

摘要

目的:探讨脂质体法及电穿孔法介导增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染体外培养的视网膜Müller细胞的可行性和区别.方法:体外培养出生后7～10d的SD大鼠视网膜Müller细胞,免疫荧光染色法鉴定95%以上为视网膜Müller细胞.分别用阳离子脂质体Lipofectamine 2000介导的脂质体转染法和电穿孔法将质粒PEGFP-N1转染视网膜Müller细胞,荧光显微镜下检测转染后1,2,3,4d的转染效率,并持续观察至转染后14d,比较两者基因表达持续时间.结果:荧光显微镜下检测转染后1d,两组均可见少量细胞表达EGFP绿色荧光蛋白.转染后2d,两者转染效率均达到最大,并且电穿孔法介导质粒PEGFP-N1转染Müller细胞效率约为31.0%±2.8%,较脂质体法转染效率(10.5%±2.4%)更高.两者比较有统计学意义(P＜0.01).随后,两者转染效率均逐渐降低.电穿孔转染后的PEGFP-N1可在视网膜Müller细胞内持续表达近14d,而脂质体转染后仅能表达约7d.结论:脂质体法和电穿孔法均适用于视网膜Müller细胞的基因转染,但电穿孔法效率更高,表达时间更长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏晓波	中南大学湘雅医院眼科	85	304	9.0	12.0
2	刘曾琦	中南大学湘雅医院眼科	1	2	1.0	1.0