环介导等温扩增(LAMP)技术检测奇异变形杆菌方法的建立

• 作者: 宋克云 张如胜 苏良 魏泉德
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 环介导等温扩增 奇异变形杆菌 ureR 检测
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用
• 页码范围: 741-743,746
• 分类号: R446.1
• 语种: 中文

摘要

[目的]建立一种检测奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)快速且特异的环介导等温扩增(LAMP)检测方法. [方法]针对奇异变形杆菌脲酶调节子编码基因(ureR)特异性序列的6个位点设计4条LAMP引物,65℃孵育约60min,完成对奇异变形杆菌的扩增,扩增产物经电泳和酶切鉴定.利用LAMP和普通PCR方法同时检测1株奇异变形杆菌和13株非奇异变形杆菌来验证LAMP方法的特异性;将奇异变形杆菌菌液做一系列10倍稀释后用LAMP和PCR方法同时进行检测来比较两者敏感性. [结果]1株奇异变形杆菌扩增出LAMP特征性梯状条带,13株非奇异变形杆菌没有出现LAMP扩增,酶切也证实了LAMP产物的特异性;LAMP检测奇异变形杆菌的特异性与普通PCR相同,但其敏感性比普通PCR高10倍:LAMP检测奇异变形杆菌的检测下限为5 cfu/ml,PCR检测下限为50 cfu/ml.LAMP检测速度相比PCR更快速,在60 min内即可完成扩增反应.[结论]建立了一种特异、敏感、快速且不需要特殊设备的奇异变形杆菌LAMP检测方法,有望用于奇异变形杆菌的快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张如胜	长沙市疾病预防控制中心微生物检验科	29	127	7.0	9.0
2	苏良	长沙市疾病预防控制中心微生物检验科	17	100	7.0	9.0
3	宋克云	长沙市疾病预防控制中心微生物检验科	19	77	6.0	8.0
4	魏泉德		26	150	8.0	11.0