小鼠神经生长因子直接竞争酶联免疫检测方法的建立

• 作者: 丁红梅 刘农乐 夏伟 李少华 李慧 李洁 柳川 王芳 赵强 邵宁生
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠神经生长因子 直接竞争酶联免疫 检测方法
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 705-708
• 分类号: R392.1
• 字数: 2909字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2011.05.024

摘要

目的:利用小鼠神经生长因子(mNGF)和纯化的兔抗mNGF IgG,建立mNGF直接竞争酶联免疫检测方法.方法:以亲和纯化兔抗mNGF IgG作为包被抗体,封闭、洗涤后加入用稀释液稀释的不同浓度的标准mNGF或样品液和生物素标记的mNGF混合液,于37C孵育80 min或室温孵育120 min,洗涤后加入辣根过氧化物酶标记的链酶亲和素,洗涤后加入显色液显色,测定D450nm值,通过标准曲线计算待测样品中mNGF含量.结果与结论:建立了mNGF直接竞争酶联免疫检测方法；该方法的灵敏度约20 ng,变异系数为批内≤10%、批间≤15%,回收率为85%～115%；利用该方法检测了3批样品中mNGF的含量.