去甲基化酶腺病毒载体构建及其在人颌下腺细胞中的表达

• 作者: 刘淑丹 周继祥 李方 李莹 杨彦春 熊剑 董世武
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 去甲基化酶基因 重组腺病毒颗粒 人颌下腺细胞
• 年，卷（期）: 2011,（22）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2349-2352
• 分类号: R394-33|R394.2
• 语种: 中文

摘要

目的 构建去甲基化酶(methyl-CpG binding domain 2,MBD2)基因腺病毒载体,并观测其在人颌下腺(human submandibular gland,HSG)细胞中的表达.方法 以HSG细胞总RNA为模板,RT-PCR法扩增MBD2基因全长编码序列,克隆入载体pMD18-T后,亚克隆入pAdTrack-CMV腺病毒穿梭载体,构建pAdTrack-MBD2重组体.该重组体与腺病毒骨架质粒pAdEmy-1于BJ5183菌中同源重组,产生重组腺病毒质粒Ad-MBD2,该质粒经293细胞包装,获得具有感染力的Ad/MBD2重组腺病毒颗粒,将该病毒颗粒感染HSG细胞,倒置显微镜检测转染后HSG细胞生长变化及MBD2在其中的表达等情况.图像分析法计算感染效率.RT-PCR法检测MBD2基因在该细胞中的表达变化.结果 成功克隆到909 bp大小的MBD2基因,构建了其腺病毒载体Ad/MBD2,该腺病毒载体经293细胞成功包装,并获具感染力的Ad/MBD2重组腺病毒颗粒,其感染效率约70％.感染的HSG高表达MBD2.结论 成功克隆到MBD2基因,构建了其重组腺病毒载体Ad/MBD2,并证实了其感染HSG细胞的有效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨彦春	第三军医大学西南医院口腔科	35	280	10.0	16.0
2	周继祥	第三军医大学西南医院口腔科	45	266	10.0	14.0
3	李莹	第三军医大学西南医院口腔科	16	73	5.0	7.0
4	熊剑	第三军医大学西南医院口腔科	3	5	1.0	2.0
5	刘淑丹	宁夏医科大学总医院干细胞研究所	9	21	3.0	4.0
6	李方	第三军医大学西南医院口腔科	3	12	2.0	3.0
7	董世武		1	1	1.0	1.0