RNAi干扰WT1和Pax2表达对逆转肾小管上皮间充质转化的作用

• 作者: 姜傥 滕军旗 皮蕾 黄彬
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: RNAi 上皮间充质转化 肾小管上皮细胞
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 442-448,510
• 分类号: R446
• 字数: 6111字
• 语种: 中文

摘要

[目的]探讨抑制肾小管上皮间充质转化(EMT)过程中胚胎发育关键基因WT1和Pax2的表达对EMT的逆转作用.[方法]采用RNAi技术分别抑制WT1和Pax2.分别构建pshRNA-WT1和pshRNA-Pax2表达载体,采用脂质体转染技术,使质粒瞬时转染NEK52E细胞后用10 ng/mLIL-1α刺激细胞,分别提取不同时间点细胞的RNA和蛋白质,采用RT-PCR 和Western blot检测细胞WT1、Pax2、Snail、上皮细胞标志E-cadherin和间充质标志α-SMA的mRNA和蛋白质的表达,并观察NRK52E细胞的形态.[结果]构建的pshRNA-WT1和pshRNA-Pax2表达载体可在转染细胞内发挥RNAi作用抑制WT1和Pax2基因的表达,抑制率分别为80.4％和82.7％.分别抑制WT1和Pax2基因后EMT过程受阻,α-SMA和Snail的表达显著减少,E-cadherin的表达无显著性变化,细胞形态未发生明显的成纤维化样改变.[结论]WT1和Pax2基因是EMT中的关键基因,分别抑制胚胎发育关键基因WT1和Pax2均可使EMT受阻.阻断WT1和Pax2的表达有望中止EMT及肾纤维化的发生.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄彬	中山大学附属第一医院检验医学部	70	408	10.0	16.0
2	姜傥	中山大学附属第一医院检验医学部	64	276	8.0	13.0
3	皮蕾	广州市妇女儿童医疗中心检验科	16	43	4.0	4.0
4	滕军旗	中山大学附属第一医院检验医学部	4	13	2.0	3.0