重组人抗血栓蛋白(rHAP)工程菌表达条件的优化

• 作者: 华子春 孙小强 杨翔 陈强 颜法宝 龚志飞
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 工学
• 关键词: 抗栓蛋白 优化培养 基因工程
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 38-42
• 页数: 5页
• 分类号: Q51|TQ92
• 语种: 中文

摘要

优化重组人抗血栓蛋白(rHAP)工程菌的培养基及培养和表达条件,提高菌体产量及可溶性的重组rHAtP蛋白含量.通过单因素及正交实验,对影响重组大肠杆菌生长及rHAP蛋白表达的培养基的组分、诱导剂的浓度、培养温度等工艺条件进行优化.结果表明半合成培养基成分的最优配比:0.5%蔗糖、1%蛋白胨、3%酵母提取物,IPTG诱导剂浓度为0.2 mmol/L,37℃培养4 h,开始诱导5 h,诱导温度为32℃.优化培养基及培养条件提高了菌体的生长密度及可溶性rHAP目标蛋白的表达量,表达菌密度OD600和可溶性rHAP目标蛋白表达量分别是没有优化前的1.85倍和2.59倍.在20 L发酵表达时,rHAP工程菌OD600值高达73,菌体湿量为1 957 g/20L.