一种蛋白质质谱分析中快速胍基化新方法

• 作者: 佟巍 张养军 毛心丽 王昕 王雪颖 秦伟捷 钱小红
• 来源期刊: 质谱学报
• 学科: 化学
• 关键词: 胍基化 微波辅助 肽 蛋白质定量
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 257-264,270
• 分类号: O657.63
• 字数: 4953字
• 语种: 中文

摘要

胍基化修饰在蛋白质组学鉴定及定量研究中发挥着重要的作用,本研究建立了一种蛋白质质谱分析中微波辅助快速胍基化的新方法.采用标准肽段系统地优化了反应溶剂pH值、O-甲基异脲的浓度及微波加热时间,发现标准肽段在pH 12的氨水溶液中,O-甲基异脲的浓度为1.5 mol/L,微波高火加热1 min的胍基化效率为99％.将此方法应用于马心肌红蛋白和牛血清白蛋白胰蛋白酶酶切肽段,质谱检测结果表明,含赖氨酸肽段的平均胍基化效率(95％)大于文献报道的平均胍基化效率(85％).与传统水浴加热胍基化方法相比,微波辅助加热胍基化方法缩短了反应时间,提高了反应效率,降低了肽段N端副反应.