携带人c-Myc和EGFP基因慢病毒表达载体的构建

• 作者: 史俊文 姚开泰 李艳青 肖东 肖高芳
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: c-Myc EGFP 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 硕博专栏论著
• 页码范围: 369-371,封4
• 分类号: R34
• 语种: 中文

摘要

目的 构建携带人c-Myc和EGFP基因的慢病毒表达载体pFUMGW.方法 Xho I线性化plenti-EFla-c-Myc-IRES-EGFP,回收片段并补平Xho I,接着BamH I酶切该片段,回收2722 bp片段而获连接用c-Myc-IRES-EGFP;EcoR I线性化pFUGW,回收并补平EcoR I,然后BamH I酶切该片段,回收9174bp片段获连接用载体片段,最后使用DNA连接试剂盒(TaKaRa)中的 Solution I将其与连接用c-Myc-IRES-EGFP连接,连接产物转化,次日挑选单菌落,提取质粒并行酶切鉴定.所构建载体命名为pFUMGW.获pFUMGW后,按Invitrogen公司推荐的标准程序进行慢病毒包装和确认慢病毒是否成功生产;携带c-Myc和EGFP基因的慢病毒感染人胚肾细胞株293、肿瘤细胞株CNE1和C666以建立相应的病毒感染体系.结果 酶切证实成功构建了pFUMGW,按标准程序生产的携带c-Myc和EGFP基因的慢病毒上清高效率感染293,CNE1和C666.结论 成功构建携带人c-Myc和EGFP基因的慢病毒表达载体pFUMGW,为相关后续研究打下了良好基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚开泰	南方医科大学肿瘤研究所	65	406	11.0	16.0
2	肖东	南方医科大学肿瘤研究所	29	117	5.0	10.0
6	李艳青	南方医科大学肿瘤研究所	2	3	1.0	1.0
7	史俊文	南方医科大学肿瘤研究所	6	11	2.0	2.0
8	肖高芳	南方医科大学肿瘤研究所	6	49	2.0	6.0