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摘要:
目的 构建含有可溶性环氧化物水解酶基因特异性的RNA干扰序列pSUPER retro neo质粒栽体,选择性下调小鼠心肌细胞可溶性环氧化物水解酶的表达,筛选出抑制效果最明显的表达质粒.方法 构建2条靶向可溶性环氧化物水解酶基因的特异性小干扰RNA质粒栽体(EH-1和EH-2),以含非特异性小干扰RNA编码序列的质粒栽体为阴性时照(pCN组),用FuGENE HD将质粒特染入原代培养的小鼠心肌细胞,并设空白对照组,转染后通过半定量RT-PCR和Western Blotting法,检测可溶性环氧化物水解酶的mRNA和蛋白表达情况.结果 与空白对照组、阴性对照组和EH-1组相比,质粒EH-2使心肌细胞可溶性环氧化物水解酶mRNA和蛋白的相对表达量明显下调(分别为0.202±0.017和0.212±0.029,P<0.01).结论 构建了特异性小干扰RNA质粒表达栽体,利用RNA干扰技术成功下调了原代培养的心肌细胞中可溶性环氧化物水解酶的表达,为进一步进行心肌细胞的RNA干扰研究奠定了基础.
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文献信息
篇名 RNA干扰下调小鼠心肌细胞可溶性环氧化物水解酶的表达
来源期刊 中国动脉硬化杂志 学科 生物学
关键词 心肌细胞 可溶性环氧化物水解酶 RNA干扰
年,卷(期) 2011,(3) 所属期刊栏目 实验研究
研究方向 页码范围 206-210
页数 分类号 Q81
字数 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 马业新 华中科技大学同济医学院附属同济医院心内科 180 905 14.0 19.0
2 杜广胜 华中科技大学同济医学院附属同济医院心内科 16 36 3.0 5.0
6 文渊 华中科技大学同济医学院附属同济医院心内科 10 57 4.0 7.0
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研究主题发展历程
节点文献
心肌细胞
可溶性环氧化物水解酶
RNA干扰
研究起点
研究来源
研究分支
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引文网络交叉学科
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期刊影响力
中国动脉硬化杂志
月刊
1007-3949
43-1262/R
大16开
湖南省衡阳市南华大学
42-165
1993
chi
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