miR-132在食管癌细胞系KYSE150中对靶基因FOXA1的调控作用

• 作者: 吕宝雷 吴文新 李书军 江中太 牛颂歌 陈彦亮
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: KYSE150 miR- 132 FOXA1
• 年，卷（期）: 2011,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1363-1366
• 分类号: R735.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2011.12.006

摘要

目的 构建miR-132真核表达载体和融合靶基因FOXA1表达载体,在食管癌细胞KYSE150中验证miR-132对靶基因FOXA1的调控作用.方法 根据miR-132序列在基因组中的位置及其上下游序列,以EC9706细胞基因组DNA为模板,扩增包含miR-132前体序列,克隆到pMD18-T Simple中,经BamHⅠ和EcoRⅠ酶切后亚克隆到质粒pcDNA3.1(+)上；通过Real-time PCR检测转染重组表达载体pcDNA3.1-miR-132的KYSE150成熟miR-132的表达水平.用生物信息学软件对miR-132的靶基因进行预测,将候选靶基因FOXA1的3′UTR区融合到pMIR荧光素酶基因下游,通过双荧光素酶报告基因检测分析miR-132对靶基因FOXA1的调控作用.将pCDNA3.1-miR-132表达质粒转染人食管癌细胞KYSE150,通过Western blot检测miR-132对FOXA1蛋白表达的影响.结果 成功构建了miR-132真核表达载体,Real-time PCR验证表明pCDNA3,1-miR-132在KYSE150细胞中能够显著地过表达成熟miR-132.生物信息学预测FOXA1可能是miR-132的靶基因.双荧光素酶报告基因分析表明miR-132能够作用于FOXA1的3′UTR.Western blot进一步证实miR-132能够抑制内源性FOXA1蛋白的表达.结论 FOXA1是miR- 132直接调控的靶基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李书军	河北医科大学第二医院胸外科	25	84	5.0	8.0
2	吴文新	河北医科大学第二医院病理科	53	200	7.0	11.0
3	江中太	河北省涉县肿瘤医院肿瘤科	9	17	3.0	3.0
4	陈彦亮	河北省涉县肿瘤医院肿瘤科	6	15	2.0	3.0
5	牛颂歌	河北省涉县肿瘤医院肿瘤科	7	20	2.0	4.0
6	吕宝雷	河北医科大学第二医院胸外科	1	0	0.0	0.0