锯缘青蟹精氨酸激酶基因的克隆与表达

• 作者: 刘光明 曹敏杰 沈苑 苏文金 蔡秋风 阮韦伟
• 来源期刊: 集美大学学报：自然科学版
• 学科: 生物学
• 关键词: 锯缘青蟹 精氨酸激酶 过敏原 cDNA克隆 重组表达
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 水产科学与生物工程
• 页码范围: 346-351
• 分类号: Q816
• 字数: 4060字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7405.2011.05.005

摘要

通过分子生物学方法,克隆得到锯缘青蟹（Scylla serrata）精氨酸激酶（Arginine Kinase,AK）开放阅读框基因序列.测序结果显示：该开放阅读框基因的序列长度为1 071 bp,编码356个氨基酸残基;该序列登录Genbank（GQ：851626）,序列比对结果显示,锯缘青蟹精氨酸激酶与凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）精氨酸激酶的氨基酸序列同源性高达94%,与岸蟹（Carcinus maenas）、中华绒鳌蟹（Eriocheir sinensis）等甲壳类动物的精氨酸激酶也有较高的同源性,均高于90%;将克隆得到的锯缘青蟹精氨酸激酶基因与pGEX-4T-3载体连接,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导得到分子质量为65 ku的融合表达蛋白（GST-AK）,经兔抗锯缘青蟹精氨酸激酶多克隆抗体的免疫印迹分析证实,GST-AK具有抗原性.