慢病毒重组同源盒基因HOXA4表达载体的构建及其感染人脐带间充质干细胞的实验性研究

• 作者: 李剑 贺文凤 贺玲 郭玲玲
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 同源基因HOXA4 慢病毒表达载体 人脐带间充质干细胞
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 471-474
• 分类号: R34
• 字数: 3000字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2011.06.001

摘要

目的 构建携带同源基因HOXA4的慢病毒表达载体,并测定其对人脐带间充质干细胞的感染效率.方法 使用酶切及PCR技术从含有HOXA4基因的质粒克隆模版HOXA4-MSCV逆转录载体中获取目的 基因HOXA4,并将HOXA4基因重组到慢病毒载体表达质粒上Lenti-GFP-CTB,通过酶切、测序验证HOXA4基因后,将Lenti-GFP-HOXA4质粒、和辅助包装质粒pRsv-REV、pMDlg-pRRE、PMD2G共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞,获得携带HOXA4基因的重组慢病毒Lentiviral-HOXA4;然后感染人脐带间充质干细胞,通过荧光显微镜及流式细胞术检测其感染效率.结果 成功构建携带HOXA4基因的慢病毒表达载体Lentiviral-HOXA4,并获得高纯度的慢病毒浓缩液.经检测病毒滴度达2.11×108 TU/ml.成功转染HOXA4基因的脐带间充质干细胞表达绿色荧光蛋白,当病毒感染复数(MOI)值为60时转染效率最高,达(95.4±4.3)%.结论 成功构建携带人HOXA4基因的慢病毒,并可以在体外有效转染人脐带间充质干细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李剑	南昌大学第二附属医院分子医学重点实验室	50	211	8.0	12.0
2	贺玲	南昌大学第二附属医院分子医学重点实验室	7	13	2.0	3.0
3	贺文凤	南昌大学第二附属医院分子医学重点实验室	24	95	5.0	9.0
4	郭玲玲	南昌大学第二附属医院分子医学重点实验室	5	5	1.0	2.0