液相芯片检测轮状病毒和诺如病毒方法的建立

• 作者: 何雅青 姚相杰 张海龙 杨洪 汪朝晖 洗慧霞 胡春凌 阳帆
• 来源期刊: 中国病毒病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 轮状病毒 诺如病毒 多重PCR 液相芯片
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 376-381
• 页数: 6页
• 分类号: R373.2
• 语种: 中文

摘要

目的 建立一种多重PCR结合液相芯片技术同时检测A型轮状病毒、GI型诺如病毒和GII型诺如病毒的方法.方法 建立多重PCR扩增方法,将PCR产物与偶联核酸探针的微球混合物进行杂交,利用Luminex 200液相芯片检测仪来检测杂交结果.对建立的A型轮状病毒、GI型诺如病毒和GII型诺如病毒液相芯片检测方法进行灵敏度、干扰性分析,并应用该方法对68份粪便样品的核酸进行检测.结果 灵敏性实验结果表明,该方法对GII型诺如病毒的检测灵敏度较高,检出限为10 pg/PCR;对轮状病毒的检出限为100 pg/PCR;该方法对GI型诺如病毒的检测灵敏度较低,检出限为1 ng/PCR.干扰性实验结果表明,轮状病毒、GI型诺如病毒和GII型诺如病毒的液相芯片检测,当病毒之间的模板量不同时(1,1、1,2、2,1、1,5、5,1、1,10、10,1、1,100、100,1),仍能够准确检测;对68份临床粪便样品的核酸进行检测,检测出A型轮状病毒样品19份,GI型诺如病毒样品1份,GII型诺如病毒样品18份;轮状病毒和GII型诺如病毒混合感染1份,GI和GII型诺如病毒混合感染1份.结论 本研究建立的轮状病毒和诺如病毒液相芯片检测方法通过一次检测能间时检测A型轮状病毒、GI型诺如病毒和GII型诺如病毒,有助于诊断病毒引起的急性腹泻.