过表达HSPC238对Bel7402细胞周期的影响

• 作者: 李明 王穗海 谭家余 黄湘
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HSPC238 过表达 Bel7402 细胞周期
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 页码范围: 120-125
• 分类号: R392.12
• 字数: 4660字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2011.02.006

摘要

目的:构建pcDNA3.1(-)/HSPC238真核表达载体,研究过表达HSPC238基因对人肝癌细胞株Bel7402细胞周期的影响.方法:采用PCR法从pET28b/HSPC238重组质粒中克隆得到HSPC238 cDNA全长序列,并将该片段亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-)中,构建pcDNA3.1(-)/HSPC238真核表达质粒.经酶切和测序鉴定后,采用脂质体法将该重组质粒转染Bel7402细胞,随后经G418筛选4周,得到阳性克隆细胞株.用RT-PCR和Western blot技术分别检测HSPC238基因在Bel7402中的mRNA和蛋白水平的表达.随后用饥饿法使各组细胞周期同步化,再用流式细胞仪分析HSPC238过表达对细胞周期的影响.结果:pcDNA3.1(-)/HSPC238经酶切鉴定及DNA测序证实,目的基因HSPC238的序列完全正确;RT-PCR和Western blot检测显示,与转染pcDNA3.1(-)组和未转染组相比较,转染pcDNA3.1(-)/HSPC238组的mRNA和蛋白表达水平均明显增高,但前两者间没有差异.用饥饿法同步化后,流式细胞仪检测显示过表达HSPC238可延缓Bel7402细胞株从G1期进入S期.结论:成功构建了pcDNA3.1(-)/HSPC238真核表达载体,并在Bel7402中表达.初步发现过表达HSPC238可延缓肝癌细胞的细胞周期,为更进一步研究HSPC238蛋白的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李明	南方医科大学生物技术学院	212	862	14.0	18.0
2	王穗海	南方医科大学生物技术学院	33	92	5.0	7.0
3	黄湘	南方医科大学附属中山市博爱医院检验科	59	175	7.0	9.0
4	谭家余	南方医科大学附属中山市博爱医院检验科	20	79	6.0	8.0