猪圆环病毒衣壳蛋白在昆虫细胞中表达形成病毒样颗粒的研究

• 作者: 周艳君 徐彦召 李国新 李玲 童光志 高景鹏
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒 昆虫细胞表达系统 重组杆状病毒 病毒样颗粒
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 15-20
• 分类号: S852.695.2
• 字数: 3596字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2011.05.003

摘要

本研究应用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统,将猪圆环病毒（Porcine circovirus,PCV）PCV2b的ORF2基因插入供体质粒pFastBacTMⅠPPH启动子控制下的多克隆位点,构建的质粒转化DH10BAC感受态细胞,经抗性和蓝白斑筛选,获得重组穿梭质粒rBacmid-cap。将rBacmid-cap转染对数生长期的Sf9昆虫细胞,间接免疫荧光试验证明目的蛋白在重组杆状病毒感染的Sf9昆虫细胞中获得了表达。将该重组杆状病毒感染HighFiveTM细胞后,用Western blot在细胞培养上清中检测到了目的蛋白,并于d 5达到表达高峰。电镜观察结果显示上清中的目的蛋白可以装配成直径约为17 nm的病毒样颗粒。病毒样颗粒在培养上清中的大量存在,为目的蛋白进一步的分离和纯化提供了便利,也为PCV2基因工程疫苗的产业化奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	童光志	中国农业科学院上海兽医研究所	168	2158	24.0	40.0
2	李玲	中国农业科学院上海兽医研究所	68	200	8.0	12.0
3	周艳君	中国农业科学院上海兽医研究所	54	442	10.0	19.0
4	李国新	中国农业科学院上海兽医研究所	29	408	10.0	20.0
5	徐彦召	中国农业科学院上海兽医研究所	11	28	2.0	5.0
6	高景鹏	中国农业科学院上海兽医研究所	2	14	1.0	2.0