CP4- EPSPS转基因蛋白的适体筛选与亲和性分析

• 作者: Jun ShengLin 江树勋 潘大仁 邵碧英 郎春燕 陈文炳 陈洪俊
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: CP4 - EPSPS转基因蛋白 SELEX 适体 诱变PCR 亲和性
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 53-57
• 分类号: Q789
• 字数: 2461字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2011.06.152

摘要

目的:通过筛选获得CP4 - EPSPS转基因蛋白的最优适体,为应用于检测作准备.方法:体外合成长度为78个碱基的随机ssDNA文库,应用指数富集配基的系统进化(SELEX)技术,以CP4 - EPSPS转基因蛋白为靶目标进行15轮筛选,将筛选到的适体群进行克隆、测序,用DNAMAN软件对每个适体的保守序列和二级结构进行分析并应用生物素-抗地高辛碱性磷酸酶显色系统进行亲和性分析.结果:成功获得靶目标的最优适体,即D04号适体,结合率最高(2.2745)为最低的5.9倍.结论:筛选流程合理、可行,实验结果较理想.