香蕉束顶病毒Rep蛋白特性分析及纯化体系的建立

• 作者: 余乃通 刘志昕 张雨良 王健华
• 来源期刊: 中国农业科技导报
• 学科: 农学
• 关键词: 香蕉束顶病毒 Rep蛋白 特性分析 纯化体系 建立
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术 生命科学
• 页码范围: 31-37
• 分类号: S432.41
• 字数: 4893字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0864.2011.02.05

摘要

以香蕉束顶病毒海口分离物DNA1(Accession NO.FJ463042)的Rep蛋白为研究对象,利用生物信息学软件对该蛋白的理化性质、结构组成、信号肽、磷酸化、二级结构、三级结构与功能结构域等作了较为详细的分析与预测,并配置了相关纯化试剂.将含重组质粒pET32b-Rep的E.coli BL21(DE3),接种到LB液体培养基,在20℃、0.1 mmol/LIPTG条件诱导4 h,产生大量的可溶性重组蛋白,经AKTA Explorer100系统亲和层析柱后,用不同梯度的Washing buffer洗脱杂蛋白并对各阶段产物进行12%SDS-PAGE分析,确定了100mmol/L咪唑的Washing buffer洗脱浓度,最终获得大量高纯度的重组蛋白.以His*Tag Monoclonal Antibody为一抗,Western blot鉴定结果表明纯化重组蛋白即为His-Rep融合蛋白.该纯化体系的建立为研究BBTVRep蛋白的结晶奠定了基础,也为今后ABTV、FBNYV、MVDV、PNYDV等病毒的相关复制蛋白纯化提供了重要数据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王健华	中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物技术重点开放实验室	37	201	8.0	13.0
2	刘志昕	中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物技术重点开放实验室	84	567	13.0	19.0
3	张雨良	中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物技术重点开放实验室	19	40	4.0	4.0
4	余乃通	中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物技术重点开放实验室	18	23	3.0	4.0