应用PCR方法向基因内部引入序列的策略研究

• 作者: 徐亚英 王勇 罗宏 陈典
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因改造 内含子 cre基因 PCR
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 88-93
• 分类号: Q81
• 字数: 3570字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9369.2011.04.018

摘要

应用PCR方法,利用3条引物与2个模板,分别采用一步PCR、两步PCR、三步PCR扩增策略,向cte基因内部引入一段内含子序列,以达到基因改造的目的.结果表明,利用一步PCR的策略,难以扩增得到目的基因,利用二步PCR的策略,虽然可以得到目的条带,但存在非特异扩增;通过三步PCR的策略,即第一步PCR扩增产物作为第二步扩增反应的引物,进行小循环的单引物扩增,第三步以第二步产物为模板进行双引物扩增的方法,可以高效扩增得到目的条带.说明三步PCR策略为基因改造的理想方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王勇	东北农业大学园艺学院	75	339	9.0	14.0
2	陈典	东北农业大学园艺学院	47	349	10.0	16.0
3	徐亚英	东北农业大学园艺学院	3	31	1.0	3.0
4	罗宏	东北农业大学园艺学院	1	1	1.0	1.0