EB病毒LMP2-LMP<em>1</em>△融合基因免疫效果的初步研究

• 作者: 叶树清 周玲 尉秀霞 曾毅 杜海军 王湛
• 来源期刊: 中国病毒病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: EB病毒 潜伏膜蛋白1 潜伏膜蛋白2 融合基因
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 45-50
• 页数: 6页
• 分类号: R392.12
• 语种: 中文

摘要

目的 构建EBV LMP2-LMP1△融合基因,初步观察融合基因体内诱导EBV特异性细胞免疫应答的效果.方法 (1)应用PCR方法构建包含EBV-LMP2全长和去除致癌基因的EBV-LMP1△融合基因,并将融合基因插入到pcDNA3.1(+)his真核表达载体中,构建重组表达质粒pcDNA-LMP2-LMP1△,Western blot和免疫荧光方法检测融合蛋白的表达.(2)使用pcDNA-LMP2-LMP1△及携带LMP1△和LMP2基因的重组腺病毒单独或联合免疫Balb/c小鼠,末次免疫1周后应用IFN-γELISPOT方法检测小鼠脾淋巴细胞中EBV特异性CTL水平.结果 (1)真核表达质粒pcDNA-LMP2-LMP1△能够在293细胞中表达LMP2-LMP1△融合蛋白,融合蛋白分子量大小正确,具有免疫原性.(2)重组质粒pcDNA-LMP2-LMP1△免疫小鼠能够诱导出EBV特异性的CTL,但诱导的CTL水平很低,1×106小鼠脾淋巴细胞中平均斑点数只有12个,远远低于LMP1△、LMP2重组腺病毒平均495个斑点数的免疫结果.但使用pcDNA-LMP2-LMP1△和重组腺病毒联合免疫,与只使用重组腺病毒相比,诱导的EBV特异性CTL水平能够显著提高,1×10 6小鼠脾淋巴细胞中平均斑点数可达1 001个(P＜0.01).结论 构建的EBV LMP2-LMP1△融合基因能够有效表达LMP2-LMP1△融合蛋白,并能够在小鼠体内诱导出EBV特异性的CTL反应,与重组腺病毒联合使用,可以提高特异性CTL应答水平.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周玲	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室	40	192	8.0	12.0
2	曾毅	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室	104	686	13.0	23.0
3	杜海军	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室	20	91	6.0	9.0
4	叶树清	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室	5	19	2.0	4.0
5	王湛	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室	8	11	2.0	3.0
6	尉秀霞	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室	2	0	0.0	0.0