次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷型EL/4细胞系的建立

• 作者: 潘晓园 禚娅 蒋砚秋 邵启祥 龚文
• 来源期刊: 江苏大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 乙基甲磺酸 8-氮杂鸟嘌呤 次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 突变 EL/4淋巴瘤细胞
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 285-288
• 分类号: R393
• 字数: 2376字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2011.04.003

摘要

目的:建立稳定的次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine guanine phosphoribosyltransferase,HGPRT)缺陷型EL/4细胞系,为小鼠T细胞杂交瘤的制备奠定基础.方法:通过乙基甲磺酸(ethyl methanesulfonate,EMS)提高EL/4细胞的基础突变率,用8-氮杂鸟嘌呤(8-Azaguanine,8-AG)从5 μg/ml到80 μg/ml浓度逐渐筛选出对8-AG有稳定抗性的细胞株EL/4,并对其生物性状与基因表型进行鉴定.结果:通过筛选获得能够耐受高浓度(80 μg/ml)8-AG的EL/4细胞,并能长期在20 μg/ml 8-AG培养液中正常生长,但不能耐受次黄嘌呤-氨甲蝶呤-胸腺嘧啶(hypoxanthine-aminopterin-thymidine,HAT)培养基(3 d全部死亡),RT-PCR未能从该EL/4细胞中检测出HGPRT基因的表达,由此可见该EL/4细胞的HGPRT基因发生突变或者缺失.将该细胞经克隆后获得单克隆细胞株,并命名为突变的EL/4(mutant EL/4,mEL/4).该细胞株能与磁珠分离的小鼠脾脏来源的CD4+T细胞在PEG作用下顺利进行融合.结论:成功建立了HGPRT缺陷型EL/4细胞系mEL/4,为制备T细胞杂交瘤奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邵启祥	江苏大学基础医学与医学技术学院免疫学研究室	78	336	9.0	14.0
2	禚娅	江苏大学基础医学与医学技术学院免疫学研究室	2	0	0.0	0.0
3	蒋砚秋	江苏大学基础医学与医学技术学院免疫学研究室	2	0	0.0	0.0
4	潘晓园	江苏大学基础医学与医学技术学院免疫学研究室	2	1	1.0	1.0
5	龚文	江苏大学基础医学与医学技术学院免疫学研究室	1	0	0.0	0.0