多头带绦虫Tm16与Tm18抗原基因的克隆及原核表达

• 作者: BLAGA R 付宝权 姚菊霞 曲自刚 李文卉 盖文燕 罗建勋 贾万忠
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 多头带绦虫 Tm16 Tm18 原核表达
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 76-79
• 分类号: S852.7
• 字数: 2483字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2011.01.19

摘要

为原核表达Tml6和Tm18重组蛋白,本研究以自然感染羊源脑多头坳原头节基因组DNA为模板分别扩增Tml6和Tm 18杭原基因全基因片段,测序鉴定后合成其开放阅读框架DNA片段,将基因组序列中的内含子去除并对其稀有密码子进行改造优化,构建重组表达质粒pGEX-Tm 16和pGEX-Tml8.转化大肠杆菌BL21后以IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达产物并进行纯化.结果显示:在大肠杆菌中表达出带有GST标签的大小约为39.6 ku和39.4 ku的重组蛋白,经谷胱甘肤琼脂糖树脂纯化得到高纯度的可溶性的GST-Tm 16及GST-Tml8重组蛋白,western blot分析表明重组蛋白均能够被兔抗GST单克隆杭体特异性识别.