摘要:
[目的]探讨PTEN基因在子宫内膜癌PI3K/AKT通路中的作用,评估PTEN基因在抗肿瘤治疗中的意义.[方法]利用慢病毒载体系统,构建人PTEN基因RNA干扰慢病毒载体和PTEN基因过表达慢病毒载体,分别转染PTEN野生型的HEC-1A细胞和PTEN突变型的Ishikawa细胞,建立PTEN基因敲减及过表达的细胞模型,Western blot方法检测PTEN基因敲减或过表达前后PTEN蛋白的表达和AKT通路的活化情况,MTT法检测慢病毒转染前后细胞增殖的变化,流式细胞术检测慢病毒转染前后细胞周期及细胞凋亡率的变化.[结果]①HEC-1A细胞转染PTEN基因干扰慢病毒载体后,细胞的增殖曲线和细胞凋亡率与对照组比较无明显变化.但Ishikawa细胞转染PTEN基因过表达慢病毒载体后,增殖曲线和细胞凋亡率显示其生长呈明显抑制状态.②当HEC-1A细胞转染了RNA干扰病毒后(HEC-1A-RNAi),Western blot结果显示PTEN蛋白表达下调,其EGFR,p-EGFR,mTOR,p-mTOR,AKT,p-AKT蛋白表达增强,当Ishikawa细胞转染了过表达载体病毒后(Ishikawa-PTEN),Western blot结果显示其PTEN蛋白表达上调,p-EGFR,p-mTOR,AKT,p-AKT蛋白表达减弱.③HEC-1A-RNAi细胞周期中G1期细胞比例减少,S期细胞比例增加,Ishikawa-PTEN细胞周期中G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少.[结论]PTEN基因可以抑制细胞增殖过程,有可能成为子宫内膜癌患者基因治疗的选择之一.