泛素特异水解酶22基因RNA干扰真核表达载体的构建及鉴定

• 作者: 吴周环 干丽君 李卫东 林玲 熊建军 龚帧
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 泛素特异水解酶22基因 RNA干扰 HepG2细胞
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 166-169
• 分类号: R9
• 语种: 中文

摘要

目的 构建泛素特异水解酶22基因(USP22)RNA干扰(RNAi)的真核表达载体,并观察其对肝癌细胞株HepG2增殖的影响.方法 根据USP22 mRNA序列,合成两条寡聚DNA片段,退火后克隆入质粒载体pMSCV/Hyg/U6.酶切和测序鉴定重组质粒pMSCV/Hyg/siUSP22.脂质体介导重组质粒转染HepG2细胞,RT-PCR和Western blot检测USP22基因mRNA和蛋白表达水平,MTT法检测细胞增殖能力.结果 经酶切鉴定筛选出的重组质粒测序结果 与目的 序列完全一致.该重组质粒转染能降低HepG2细胞USP22 mRNA及蛋白质表达,并抑制细胞增殖.结论 成功构建USP22基因RNAi真核表达载体,该载体通过下调USP22基因表达,抑制HepG2细胞的增殖能力,为进一步研究USP22的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊建军	九江学院基础医学院药理教研室	21	28	4.0	4.0
3	林玲	九江学院基础医学院药理教研室	12	48	4.0	6.0
4	龚帧	九江学院基础医学院药理教研室	21	58	4.0	6.0
5	吴周环	九江学院基础医学院药理教研室	18	57	4.0	6.0
8	干丽君	九江学院基础医学院药理教研室	19	35	3.0	4.0
9	李卫东	江西省高等学校系统生物学临床应用重点实验室	3	7	2.0	2.0