番茄环纹斑点病毒核壳体蛋白抗血清制备及其血清学特性分析

• 作者: 丁铭 尹跃艳 张仲凯 方琦 李婷婷 程晓非 董家红
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 番茄环纹斑点病毒 核壳体蛋白 原核表达 血清学相关性
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 细胞生物学、生理学、生物化学、分子生物学
• 页码范围: 482-485
• 分类号: S432.41
• 字数: 2751字
• 语种: 中文

摘要

番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)是番茄斑萎病毒属的一个新种,对云南番茄、辣椒生产造成严重危害.用RT-PCR从感病番茄中扩增得到长度为837 bp TZSV的核壳体蛋白基因(N基因),将其克隆到原核表达载体pET-28a(+),获得重组原核表达载体pET-TZSV-N,在大肠杆菌BL21中表达,SDS-PAGE分析表明,该载体高效表达33kDa的融合蛋白；以纯化的融合蛋白作为抗原免疫家兔制备TZSV核壳体蛋白(N蛋白)的多克隆抗体,间接酶联免疫测定(ID-ELISA)表明效价为1/6 000；Western blot分析表明,该抗血清能与西瓜银色斑驳病毒(WSMoV)血清组的辣椒褪绿病毒(CaCV)反应,而与番茄斑萎病毒(TSWV)、凤仙花坏死斑病毒(INSV)无血清交叉反应,说明获得的抗血清能用于WS-MoV血清组成员的检测,TZSV属于WSMoV血清组成员.