转染小鼠CXCR3基因的B16-mCXCR3细胞在体内外迁移和致瘤作用研究

• 作者: 刘玉华 孙杰 张彦军 朱华亭 邱玉华 郭静雅 陈昌友 黄莉 黄赛男
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CXCR3 B16细胞 基因转染 肿瘤转移 细胞迁移
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 25-28,33
• 分类号: R392.11
• 字数: 3616字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2011.01.006

摘要

目的:建立稳定表达小鼠CXCR3基因的B16细胞株,研究CXCR3分子在肿瘤形成及转移过程中的作用.方法:采用PCR方法从pMD19-T/mCXCR3质粒中扩增CXCR3基因,插入到真核表达载体pIRES2-EGFP中,脂质体法转染小鼠黑色素瘤细胞B16;G418加压筛选阳性克隆,分别用RT-PCR方法与免疫荧光技术分析阳性克隆中CXCR3在mRNA和蛋白水平的表达.采用Transwell系统检测B16-mCXCR3细胞在其配体IP-10介导下的迁移能力.将B16-mCXCR3细胞分别通过皮下和眼静脉注射接种于BALB/c小鼠,观察在小鼠体内的成瘤率及肿瘤转移情况.结果:构建了表达小鼠CXCR3基因的真核表达载体pIRES2-EGFP/mCXCR3,转染该载体后获得了稳定表达CXCR3的B16-mCXCR3细胞.B16-mCXCR3细胞(1×105个),在20 ìg/L IP-10作用下迁移的细胞数为3 208个,与B16组和B16-mock组相比均具有统计学意义(P＜0.01).于小鼠皮下接种B16-mCXCR3细胞、B16细胞和B16-mock细胞,第20天成瘤率均为100%.于小鼠眼静脉注射B16-mCXCR3细胞,第21天时50%的小鼠在肺部出现肉眼可见的黑色肿瘤转移灶,B16细胞组和B16-mock细胞组肺部未见肿瘤转移灶,B16-mCXCR3组与B16组和B16-mock组相比均具有统计学意义(P＜0.01).结论:转染CXCR3基因的B16-mCXCR3细胞,在IP-10介导下可定向迁移,并可增加在小鼠体内的转移率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邱玉华	苏州大学医学部免疫学系	89	426	11.0	15.0
2	黄莉	苏州大学附属儿童医院呼吸科	59	345	11.0	16.0
3	朱华亭	苏州大学医学部免疫学系	23	96	6.0	9.0
4	刘玉华	杭州师范大学附属医院检验科	17	50	5.0	6.0
5	孙杰	苏州大学医学部免疫学系	6	11	2.0	3.0
6	张彦军	苏州大学医学部免疫学系	6	26	4.0	5.0
7	黄赛男	苏州大学医学部免疫学系	6	26	4.0	5.0
8	郭静雅	苏州大学医学部免疫学系	7	39	4.0	6.0
9	陈昌友	苏州大学医学部免疫学系	7	31	4.0	5.0