新型穿膜肽作为基因运输载体的实验研究

• 作者: 任建丽 张清凤 王志刚 田菊
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 固相合成 穿膜肽 基因载体
• 年，卷（期）: 2011,（24）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2562-2566
• 分类号: R394-33|R394.2
• 语种: 中文

摘要

目的 人工设计合成穿膜肽新序列(CGRLWMRWYSPWARRYGC),并于体外考察其作为基因载体的潜力.方法 采用Na_芴甲氧羰基(Fmoc)法固相合成穿膜肽新序列,并用异硫氰酸荧光素(Frrc)标记N端.高效液相色谱及质谱仪检测其纯度及相对分子质量,流式细胞仪及共聚焦显微镜观察其穿膜能力,荧光显微镜和流式细胞仪观察其携带增强型绿色荧光蛋白质粒( pEGFP)进入细胞表达情况,MTT评价穿膜肽与质粒复合物的细胞毒性,琼脂糖凝胶电泳检测穿膜肽与质粒的亲和力及对质粒的保护作用.结果 合成的穿膜肽纯度为96.13％,相对分子质量为2 348.42,流式细胞仪检测显示荧光阳性细胞平均约占98.81％,共聚焦显微镜可见荧光标记的穿膜肽分布于细胞内；穿膜肽携带质粒在人脐静脉内皮细胞中的表达率平均约为11.44％；不同电荷比的复合物对细胞的活性没有明显影响(P＞0.05)；琼脂糖凝胶电泳显示当穿膜肽与质粒的电荷比大于2:1时,质粒不能迁移出来,电荷比为4:1、8:1和16:1的复合物能够抵抗DNA酶Ⅰ的消化作用,以8:1最为明显.结论 人工设计合成的新型穿膜肽能够作为一种潜在的基因运输载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王志刚	重庆医科大学超声影像学研究所	418	2950	24.0	36.0
2	任建丽	重庆医科大学超声影像学研究所	48	227	7.0	13.0
3	田菊	重庆医科大学超声影像学研究所	4	11	2.0	3.0
4	张清凤	重庆医科大学超声影像学研究所	3	10	2.0	3.0