携带信号肽NT4-GFP-穿膜肽Ant融合基因的重组腺相关病毒载体的构建及意义

• 作者: 吴昊 吴江 孙欣 杨宇 杨广笑 王全颖
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 绿色荧光蛋白 信号引导肽 穿膜肽 基因克隆
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 798-802
• 页数: 5页
• 分类号: Q784
• 字数: 3296字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.2007.05.006

摘要

目的:构建携带具有穿膜功能的融合报告基因NT4-GFP-Ant基因的重组腺相关病毒载体.方法:应用PCR技术和T载体克隆法克隆绿色荧光蛋白(GFP)基因;用T4 DNA连接酶将测序正确的GFP与已构建成功的Ant基因片段及PBV220/NT4线性质粒载体定向连接,构建PBV220/NT4-GFP-Ant融合载体,酶切获取融合基因,并将其连入腺相关病毒载体PSSHG中,构建PSSHG/NT4-GFP-Ant重组腺相关载体并进行酶切鉴定.结果:T-easy/GFP经EcoRⅠ酶切后,可得到730 bp左右的片段,GFP基因经DNA测序证实与GenBank序列一致;pBV220/NT4-GFP-Ant经BamHI/EcoRⅠ联合双酶切后,得到约为 1 000 bp的基因片段;PSSHG /NT4-GFP-Ant经 BamHI/EcoRⅠ联合双酶切后,得到大小约为1 000 bp长度的基因片段.结论:成功克隆GFP基因,成功构建NT4信号肽-GFP-Ant穿膜肽融合基因和PSSHG/NT4-GFP-Ant重组腺相关病毒载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴昊	吉林大学第一医院肾内科	144	523	11.0	18.0
2	王全颖		62	151	5.0	8.0
3	杨广笑		67	148	5.0	7.0
4	杨宇	吉林大学第一医院神经内科	58	203	7.0	11.0
5	吴江	吉林大学第一医院神经内科	157	910	16.0	22.0
6	孙欣	吉林大学第一医院神经内科	17	45	4.0	6.0