牛新孢子虫二温式PCR检测方法的建立与应用

• 作者: 季新成 张玲 牛国辉 王文 郑培
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 新孢子虫 二温式PCR 均匀设计 牛
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 17-20
• 分类号: S852.723|Q789
• 字数: 3017字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2011.08.004

摘要

根据已发表的犬新孢子虫种属特异性基因片段Nc-5基因序列设计合成一对特异性引物,采用均匀设计方法对引物浓度、Mg2+浓度、dNTP、Taq酶和退火温度进行了优化,建立了检测牛新孢子虫的二温式PCR方法.该方法对牛新孢子虫DNA的检测灵敏度为23.5 fg/反应.应用该方法对50份全血和8份流产胎儿样本进行了检测,有3份全血和1份流产胎儿样本为阳性.与三步法PCR相比较,该二温式PCR方法检测时间缩短了30 min,且方法具有快速、灵敏、准确、特异等优点,可用来对牛新孢子虫病的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	季新成		42	156	7.0	8.0
2	王文		9	126	6.0	9.0
3	张玲		3	12	2.0	3.0
4	牛国辉		4	27	4.0	4.0
5	郑培		2	15	2.0	2.0