检测牛感染犬新孢子虫的TaqMan-MGB Real-time PCR方法的建立

• 作者: 刘梦丽 史亚明 吉尔格力 巴音查汗 王振宝 许正茂 陈千林
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 新孢子虫病 Real-time PCR 3D数字PCR TaqMan-MGB探针 Nc2基因
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 页码范围: 58-64
• 分类号: S858.23|S855.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2016.12.08

摘要

为建立牛感染犬新孢子虫的Real-time PCR检测方法,根据犬新孢子虫Nc2基因保守序列设计特异性检测引物和TaqMan-MGB探针,建立新孢子虫病TaqMan-MGB Real-time PCR检测方法.PCR扩增产物约为150bp,与预期片段大小相符;Real-time PCR扩增表明,Ct值与梯度稀释的阳性质粒模板呈良好的线性关系;当检测牛源性弓形虫、牛环形泰勒和牛巴贝斯等虫种阳性DNA时均为阴性;经3D数字PCR判定,Real-time PCR方法的最低有效检测量为6.41拷贝/μL,灵敏性是常规PCR的1 000倍;重复性试验的组内平均变异系数为1.108％,组间为2.732％;本方法与《新孢子虫病检疫技术规范》(SN/T 3499-2013)的检测符合率为100％(46/46).该Real-time PCR方法可用于早期诊断和日常监测家畜感染犬新孢子虫.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	巴音查汗	新疆农业大学动物医学学院	150	688	13.0	17.0
2	许正茂	新疆农业大学动物医学学院	18	38	4.0	5.0
3	陈千林	新疆农业大学动物医学学院	14	49	4.0	5.0
4	刘梦丽	新疆农业大学动物医学学院	18	51	5.0	5.0
5	史亚明	新疆农业大学动物医学学院	1	2	1.0	1.0