Stealth核糖核苷酸干扰抑制胰腺癌细胞DNMT1表达的研究

• 作者: 卜淑蕊 钱家鸣
• 来源期刊: 中国临床医学
• 学科: 医学
• 关键词: 胰腺癌 RNA干扰 甲基化转移酶1
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 757-760
• 分类号: R735.9
• 字数: 3678字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-6358.2011.06.009

摘要

目的:研究靶向甲基化转移酶1(DNMT1)基因的Stealth核糖核苷酸干扰(RNAi)技术对胰腺癌细胞Panc-1中DNMT1表达的抑制作用.方法:通过Block-IT TM RNAi Designer在线设计合成针对DNMT1的Stealth核糖核苷酸(siRNA),以50 nM siRNA用脂质体转染法转染Panc-1细胞.同时设空白对照组,RNAi阴性对照组,荧光RNAi组,每组3个复孔；在转染24 h、48h、72h后用荧光显微镜观察转染效率,以48h荧光强度最亮.应用逆转录聚合酶链反应(RT- PCR)检测DMNT1信使核糖核酸(mRNA)含量,免疫印迹(Western blot)检测DNMT1蛋白的表达.结果:将靶向DNMT1基因Stealth RNAi转染到胰腺癌细胞Panc-1中后,Panc-1细胞在转染RNAi后48h的转染效率为50％～60％；DNMT1的蛋白和mRNA水平显著下调,与对照组相比,转染后48h的相对抑制率分别为68％和67.8％(P＜0.05),也显著低于空白对照组及空载体组(P＜0.05).结论:DNMT1靶向的Stealth RNA瞬时转染到胰腺癌细胞Panc-1中可显著沉默DNMT1的基因和蛋白的表达,为胰腺癌的基因治疗提供新的理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卜淑蕊	复旦大学附属金山医院消化科	15	86	4.0	9.0