鸟枪法筛选枯草芽孢杆菌基因强启动子及对黄牛GHRL基因的表达

• 作者: 张丽 张爱玲 张良志 杨明明 陈宏
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 枯草芽孢杆菌 大肠埃希菌 启动子探针载体 GHRL基因 牛 鸟枪法
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 动物科学与兽医学
• 页码范围: 92-96
• 分类号: S852.65
• 字数: 4640字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-411X.2011.03.021

摘要

利用鸟枪法通过大肠埃希菌-枯草芽孢杆菌启动子探针载体分离到枯草芽孢杆菌168菌株的103个基因启动子片段,发现1个672 bp的启动子片段P3.4.23,能够在大肠埃希菌和枯草芽孢杆菌高效启动报告基因β-半乳糖苷酶的表达,其酶活性分别达到3 418、2 877 U/mL.相似性分析表明P3.4.23启动子片段具有枯草芽孢杆菌基因启动子的保守序列,并确定其转录活性区域位于5～333 bp,为iE基因的调控序列.将黄牛GHRL基因导入到启动子亚克隆序列下游,使该基因在枯草芽孢杆菌中得到了表达.