水稻OSNADK3基因的克隆及其遗传转化

• 作者: 丛悦玺 吴丽丽 周丛 郭万里 陈坤明 高永生
• 来源期刊: 核农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 水稻 NADK3 GFP 遗传转化
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 863-870
• 分类号: S511.01
• 语种: 中文

摘要

从韩国浦项科技大学（Pohang University of Science and Technology,POSTECH）水稻T-DNA插入突变体库PFG_3A-04871.R株系中筛选到一个NADK3（NAD Kinase 3）激酶（LOC_Os05g32210）基因OSNADK3表达缺失的突变杂合体。与其野生型Dongjing（Oryza sativa L.var.japonica cv Dongjing）比较,该OSNADK3基因突变杂合体表现出明显的植株矮小、花发育异常以及不育等特点。为明确水稻NADK3激酶的功能,我们利用RT-PCR的方法克隆了水稻（Dongjing）OSNADK3基因的编码区（CDS）,将OSNADK3导入表达载体pCAMBIA1301：：35S：：GFP（pCG）中,构建了OSNADK3和绿色荧光蛋白（GFP）融合表达载体pCAMBIA1301：：35S：：NADK3：：GFP（pCNG）,该融合表达载体能够在拟南芥叶中表达,亚细胞组织定位分析表明,OSNADK3在拟南芥细胞质中表达,表明该酶是细胞质定位的酶类。然后,利用农杆菌介导的方法侵染水稻愈伤组织,获得了24株独立的转基因水稻植株。经PCR初步鉴定,目的片段OSNADK3已经成功整合到水稻基因组中,为进一步深入研究水稻OSNADK3的功能与作用机制奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高永生	中国计量学院生命科学学院	30	161	8.0	11.0
2	郭万里	浙江大学农业与生物技术学院作物科学研究所	8	106	5.0	8.0
3	吴丽丽	中国计量学院生命科学学院	4	46	3.0	4.0
4	丛悦玺	浙江大学农业与生物技术学院作物科学研究所	4	40	3.0	4.0
5	陈坤明	西北农林科技大学生命科学学院	17	76	5.0	8.0
6	周丛	浙江大学农业与生物技术学院作物科学研究所	1	3	1.0	1.0