龟版有效成分抗无血清损伤表皮干细胞凋亡的研究

• 作者: 伍艺灵 刘洋 周健洪 曹佳会 李伊为 李春 陈东风 陈兰 黎晖
• 来源期刊: 中西医结合学报
• 学科: 医学
• 关键词: 龟版 表皮干细胞 凋亡 Bcl-2 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 试验论著
• 页码范围: 888-893
• 分类号: R285
• 字数: 3907字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3736/jcim20110811

摘要

目的:探讨龟版有效成分对无血清培养所致的表皮干细胞(epidermal stem cell,ESC)凋亡的药效作用和可能机制.方法:分离培养孕龄2周的Sprague-Dawley胎鼠背部皮肤制备ESC,分为正常组、模型对照组和龟版有效成分各组.采用含龟版有效成分的无血清达尔伯克改良伊格尔培养基培养24、48和72 h后,用3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5---苯基四氮唑溴盐（3-（4,5-dimethyhhiazol-2-yl）-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)法检测ESC的活力,筛选药物最佳作用时间；ESC用各药物培养48 h后,异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V和碘化丙锭双标后用流式细胞仪检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (caspase-3)和Bcl-2蛋白的表达水平.结果:MTT检测结果表明,在24、48和72 h时各有效成分组ESC活力较模型对照组增强(P＜0.01),且作用48 h时乙酸乙酯部位提取物组ESC活力高于十八酸乙酯、十四酸甾醇酯、4-甾酮各组(P＜0.05,P＜0.01).作用48 h时,乙酸乙酯部位提取物抗凋亡效果最强,4-甾酮抗凋亡效果最弱.蛋白免疫印迹结果表明,乙酸乙酯部位提取物、十八酸乙酯、十四酸甾醇酯、4-甾酮均能显著上调Bcl-2和下调caspase-3的表达,有抗凋亡作用.结论:乙酸乙酯部位提取物有较强的抗ESC凋亡作用,优于它的各组分单独作用,调控Bcl-2与caspase-3之间的表达平衡可能是其抗ESC凋亡的机制之一.