绵羊肺腺瘤病毒的巢式RT-PCR技术检测

• 作者: 刘淑英 罗学东 赵泽赟
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 绵羊肺腺瘤病 绵羊肺腺瘤病毒 巢式RT-PCR
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 547-551
• 分类号: R373
• 字数: 3994字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2011.06.021

摘要

目的 为能够更加准确、敏感的检测绵羊肺腺瘤病(sheep pulmonary adenomatosis SPA).方法 本试验通过外源性绵羊肺腺瘤病毒的囊膜基因env的TM区和长末端重复序列LTR的U3区分别设计特异性的内外侧引物,运用巢式RT-PCR的方法 进行检测,同时与普通RT-PCR进行比较.结果 测得的绵羊肺腺瘤病毒的env基因和U3区序列与Gen-Bank中发表的外源性绵羊肺腺瘤病毒基因序列(AF105220)同源性分别为100%和98%.特异性试验结果 表明本试验设计的env基因和LTR的U3区的内外侧引物不能从健康绵羊、小鼠、家兔的肺组织以及感染了SPA羊的肾、肝、脾的RNA中扩增出条带.敏感性试验结果 表明,env基因和LTR的U3区的巢式RT-PCR诊断方法 最低能检测出的标准模板RNA量分别为48fg和48 pg,而普通的RT-PCR,env基因及LTR的U3区的最低检出量分别为0.48 ng和4.8 ng.得出巢式RT-PCR的敏感性高于普通RT-PCR,同时env基因的敏感性高于LTR的U3区的敏感性.结论 以上试验说明巢式RT-PCR技术对于检测绵羊肺腺瘤病具有很高的敏感性和实用性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵泽赟	内蒙古农业大学兽医学院	1	8	1.0	1.0
2	刘淑英	内蒙古农业大学兽医学院	65	390	10.0	16.0
3	罗学东		1	8	1.0	1.0