小麦黄花叶病毒P1蛋白原核表达、抗血清制备及其检测

• 作者: 向荣 孙丽英 孙炳剑 陈剑平
• 来源期刊: 浙江农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小麦黄花叶病毒 P1基因 克隆 原核表达 抗血清制备 血清学检测
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 324-328
• 分类号: S435.12
• 字数: 3645字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-1524.2011.02.025

摘要

用RT-PCR方法从感染小麦黄花叶病毒(Wheat yellow mosaic virus,WYMV)扬州分离物的小麦叶片中扩增获得该病毒P1基因的全长cDNA片段,并进行了序列分析.结果表明,P1基因编码区含有765个核苷酸,编码1个由255氨基酸组成分子量为28.2 kDa的蛋白.将P1基因亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中构建重组原核表达载体pCEX 6P-1-P1,经IPTG诱导,P1蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达GST-P1的融合蛋白,纯化并制备了P1蛋白的兔抗血清.利用此抗血清,可以检测WYMV病叶中的P1蛋白,但与提纯的WYMV粒子没有血清学反应,表明P1没有参与WYMV粒子的包装,是一种非结构蛋白.