Hsa-mir-216a真核表达载体的构建及其在胃癌细胞SGC7901/DDP中的表达

• 作者: 冷加燕 吴晓君 姚俊 徐红美 许文林 陈巧云
• 来源期刊: 江苏大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: mir-216a 真核表达载体 SGC7901/DDP细胞 转染
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 289-293
• 分类号: R737.9
• 字数: 3696字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2011.04.004

摘要

目的:构建人mir-216a真核表达载体,实现其在胃癌细胞SGC7901/DDP中的表达,为进一步研究mir-216a的功能打下基础.方法:依据miRBase数据库中pre-mir-216a序列设计引物;PCR扩增pre-mir-216a基因并将其克隆至pGenesil-1载体;将pGenesil-1-hsa-mir-216a质粒转染SGC7901/DDP细胞,RT-PCR及实时定量RCR法检测成熟mir-216a在SGC7901/DDP细胞中的表达.结果:pGenesil-1-hsa-mir-216a质粒经酶切及测序鉴定正确;pGenesil-1-hsa-mir-216a质粒转染进SGC7901/DDP细胞后,RT-PCR检测mir-216a成熟体表达明显增强,实时定量PCR检测S/D/mir-216a组mir-216a成熟体表达较S/D/HK组上调(63.530±0.159)倍(t=1.201,P<0.01).结论:成功构建了pGenesil-1-hsa-mir-216a真核表达质粒,并在胃癌细胞SGC/DDP中高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚俊	江苏大学附属人民医院中心实验室	25	71	5.0	7.0
2	许文林	江苏大学附属人民医院中心实验室	61	265	8.0	11.0
3	冷加燕	江苏大学附属人民医院中心实验室	8	10	2.0	2.0
4	徐红美	江苏大学附属人民医院中心实验室	4	5	2.0	2.0
5	吴晓君	江苏大学附属人民医院中心实验室	7	27	2.0	5.0
6	陈巧云	江苏大学附属人民医院中心实验室	33	140	7.0	10.0