茄子RAPD分子标记体系的建立与优化

• 作者: 吴雪霞 朱宗文 李贤 查丁石 金海军
• 来源期刊: 江西农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 茄子 RAPD 体系优化
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 园艺园林
• 页码范围: 51-53
• 分类号: S641.1
• 字数: 2308字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-8581.2011.06.016

摘要

采用改良的CTAB法提取茄子基因组DNA,并通过单因素多水平梯度试验,比较筛选RAPD扩增体系的各影响因素,建立了茄子RAPD-PCR的最佳反应体系:20μL反应体系其中含25 mmol/L MgCl22.0μL、10×PCR Buffer 2.0μL、10mmol/LdNTP 0.5μL、5 U/μLTaq E 0.2μL、0.1μmol/L Primer 3μL、10 ng/L模板DNA 3μL、灭菌双蒸水9.3μL.扩增程序为:94℃预变性5 min；94℃变性1 min,37℃退火1 min,72℃延伸1.5 min,45个循环；72℃延伸10 min后4℃保存.