禽波氏杆菌RAPD-PCR反应体系的建立与优化

• 作者: 刘冠华 朱瑞良 杨萍萍 贺晓华 赵雪
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 禽波氏杆菌 RAPD 反应体系 优化
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 16-19
• 页数: 4页
• 分类号: S852.61
• 语种: 中文

摘要

随机扩增多态性DNA (RAPD)作为一种分子标记技术,可用于多种病原菌的基因分型.为建立适合禽波氏杆菌RAPD分析的扩增体系,本试验以禽波氏杆菌基因组DNA为模板,对20条随机引物进行了筛选,并对RAPD-PCR反应体系中的重要参数设置梯度进行单因素试验分析,以确定最佳反应条件.经大量重复试验筛选到6条随机引物,确定25 μL的反应体系中模板DNA的量为50 ng,随机引物浓度为0.2 μmol/L,dNTPs的量为0.2 mmol/L,Mg2+浓度为1 mmol/L,Taq酶为1U.该优化体系对22株禽波氏杆菌均能扩增出清晰稳定且多态性好的DNA指纹图谱,为后续的禽波氏杆菌RAPD基因分型奠定了良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱瑞良	山东农业大学动物科技学院	161	909	16.0	22.0
2	刘冠华	山东农业大学动物科技学院	10	56	6.0	7.0
3	杨萍萍	山东农业大学动物科技学院	38	207	7.0	13.0
4	赵雪	山东农业大学动物科技学院	11	16	2.0	3.0
5	贺晓华	山东农业大学动物科技学院	4	10	1.0	3.0