河鲈RAPD-PCR反应体系的建立与优化及引物筛选

• 作者: 杨迪 王艳萍 胡文革 董艳艳 路李鹏 陈登稳 韩晶
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 河鲈 RAPD-PCR 条件优化 适用引物 退火温度
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 114-118
• 语种: 中文

摘要

以河鲈为研究材料,对河鲈RAPD-PCR的反应体系进行优化和适用引物的筛选,采用正交设计方法,选用L17(54)正交表,以河鲈基因组DNA为模板,对影响PCR反应较大的4个因素:Taq酶、Mg2+、dNTPs、引物在5个水平上进行优化试验,得到河鲈最优RAPD-PCR反应体系:25 μL反应体系中含有30 ng DNA模板1.5 μL,10 μmol/L引物0.7 μL,10×buffer 2.5 μL,25mol/LdNTPs 0.4μL,5UTaq酶0.2 μL,2.5 mmol/L MgCl2 3.0 μL;利用优化体系从50条引物中筛选得到10条适用引物,并确定了引物的最佳退火温度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩晶	石河子大学生命科学学院	10	55	4.0	7.0
2	胡文革	石河子大学生命科学学院	37	347	10.0	17.0
3	王艳萍	石河子大学生命科学学院	9	22	2.0	4.0
4	路李鹏	石河子大学生命科学学院	5	48	3.0	5.0
5	陈登稳	石河子大学生命科学学院	4	48	3.0	4.0
6	杨迪	石河子大学生命科学学院	3	41	2.0	3.0
7	董艳艳	石河子大学生命科学学院	3	32	2.0	3.0