农杆菌介导的大豆成熟胚芽尖遗传转化体系的优化

• 作者: 朱丹华 杨海英 杨清华 胡小丽 董德坤 袁凤杰
• 来源期刊: 核农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆 根癌农杆菌 胚芽尖 遗传转化
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 665-672
• 分类号: S513
• 语种: 中文

摘要

以大豆品种‘浙春3号’的胚芽尖为受体材料,利用农杆菌介导法转化抗逆相关大豆转录因子GmGT-2A,为探讨过量表达该基因以提高大豆对非生物胁迫的抗逆性准备材料,通过研究预培养时间、共培养培养基的6-BA浓度、侵染时间等因子对转化效率的影响,系统优化了大豆的成熟胚芽尖转化体系。单因素优化实验结果表明：预培养时间、6-BA浓度和侵染时间均对大豆遗传转化有显著的影响,三者各自最优条件分别为胚芽尖预培养时间1.5d;共培养基6-BA浓度8mg/L和浸染时间10h。根据以上结果设计三因素三水平正交试验对转化体系进行系统优化,结果表明：以上因素对转化效率的影响程度从大到小依次为：侵染时间、预培养时间和6-BA浓度;最佳转化体系中各因素水平与单因素优化结果一致。本研究获得的最高平均转化效率为5.67%。实验还初步探讨了IBA浓度对再生苗生根的影响,结果表明在生根培养基中不加入IBA比加入IBA时生根时间短,且生根数量多,移栽易成活。利用上述方法得到的抗性苗,经目的基因、标记基因和构建特异性的PCR检测,表明目的基因已成功导入到大豆基因组中。