新型鸭呼肠孤病毒RT-PCR方法的建立与应用

• 作者: 朱小丽 李兆龙 林锋强 江斌 王劭 程晓霞 陈仕龙 陈少莺
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 新型鸭呼肠孤病毒 RT-PCR 检测
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 技术改进
• 页码范围: 388-392
• 分类号: S858.31
• 字数: 3031字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2011.02.028

摘要

研究建立检测新型鸭呼肠孤病毒(novel duck reovirus,NDRV)的RT-PCR方法,并运用建立的检测方法对分离毒与人工感染样品进行应用检测.根据NDRV-NP03株S3基因全序列(NDRV-NP03,GenBank登录号:GQ888710),设计合成了一对引物,以NDRV分离株为模板,建立了检测NDRV的RT-PCR方法.结果显示:该方法仅能从NDRV分离毒中扩增到与预期大小相符长度为586 bp的特异性目的片段,检测灵敏度达到2 pg病毒RNA,而其它病毒,番鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirus,MDRV)、禽呼肠孤病毒(Avian reovirus,ARV)、鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)、番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)、鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)、鸭副粘病毒(Duck paramyxovirus,DPMV)、鸭病毒性肝炎病毒(Duck hepatitis virus,DHV)等样品的扩增结果均为阴性.应用该方法对8株NDRV分离毒和3份人工感染鸭肝脾组织进行检测均为阳性.表明建立的RT-PCR方法特异性强、敏感度高,可用于NDRV的临床诊断和流行病学调查.