新型鸭呼肠孤病毒RT-LAMP检测方法的建立

• 作者: 于可响 刘存霞 宋敏训 李玉峰 韩宏宇 马秀丽 黄兵
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 新型鸭呼肠孤病毒 S3基因 一步反转录环介导等温扩增
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 71-75
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.08.011

摘要

建立适于基层实验室快速检测新型鸭呼肠孤病毒（Novel duck reovirus，NDRV）的一步反转录环介导等温扩增（RT-LAMP）方法。基于新型鸭呼肠孤病毒S3基因的6个保守区域设计了4条LAMP引物，利用Bst DNA聚合酶在63℃恒温保持45 min即可完成反转录和扩增反应，由此建立了RT-LAMP检测方法。该方法具有良好的特异性，除NDRV外对其他6种常见鸭病的检测结果均为阴性。该方法对病毒RNA的最低检出量为0.1 pg，是常规RT-PCR方法的100倍。临床应用结果表明，该方法与病毒分离鉴定方法的符合率为98%，而且对仪器的要求低，适于基层实验室和现场检测。