应用免疫磁珠分离法及荧光定量 PCR技术快速检测肠出血性大肠埃希菌O157∶H7

• 作者: 刘凯 叶长芸 熊衍文 王涛 王艳 綦廷娜
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 免疫磁珠分离法 荧光定量PCR 大肠埃希菌O157∶H7
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 291-293,315
• 分类号: R378.2
• 字数: 2624字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2011.04.006

摘要

目的 建立免疫磁珠分离法(immunomagnetic separation,IMS)联合荧光定量PCR(real-time PCR)技术快速检测肠出血性大肠埃希菌O157∶H7的方法.方法 根据肠出血性大肠埃希菌O157∶H7抗原特异性基因rfbEO157设计引物和荧光探针,建立real-time PCR 检测体系,并检测其特异性及敏感性;用O157免疫磁珠特异性捕获标本菌液中的O157∶H7大肠埃希菌,结合real-time PCR对磁珠捕获菌细胞的DNA进行检测分析.结果 Real-time PCR检测结果显示,O157∶H7大肠埃希菌可产生荧光信号,而其他常见致病菌均未见明显荧光信号;采用IMS-real-time PCR方法检测标本,菌液含菌量为3.3×102 CFU/mL时即可被检出,检测全过程需时约4h.结论 IMS-real-time PCR检测方法具有特异性强、敏感度高、快速易操作等特点,该检测方法能提高O157∶H7大肠埃希菌的检出率和准确性,可用于标本的快速诊断、疾病监测和暴发疫情的病原学调查.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王涛	贵阳医学院微生物学教研室	28	53	5.0	5.0
2	綦廷娜	贵阳医学院微生物学教研室	10	41	5.0	6.0