肠出血性大肠埃希菌O157:H7多重PCR检测方法的建立

• 作者: 刘军 刘彦晶 周伟 姜海艳 孙洋 孙诗雯 张雪 梁冰 祝令伟 纪雪 郭学军
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 肠出血性大肠埃希菌O157:H7 多重PCR 检测 rfbE基因
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 分类号: S852.612
• 字数: 4667字
• 语种: 中文

摘要

为建立肠出血性大肠埃希菌O157:H7的多重PCR检测方法,针对O157菌特异性eaeA基因、fliC基因、志贺毒素基因(stx1和stx2)及rfbE基因设计5对引物,构建多重PCR反应体系,优化反应的引物浓度和温度检测其特异性和敏感性,并对牛、猪、鸡及犬等不同动物来源的样品进行了大肠埃希菌O157检测.结果显示,该方法具有良好的特异性和敏感性,敏感性达到5×103 CFU.从检测阳性样本中均分离到目的菌.应用建立的方法在确定样品中是否含有大肠埃希菌O157的同时,还能对菌株毒力进行初步判定.成功建立了肠出血性大肠埃希菌O157:H7多重PCR检测方法,为该病原菌感染的预防和监测提供了简便、快速的技术手段,具有良好的应用前景.