正交设计优化聚乙烯亚胺介导肝癌细胞基因转染效率的研究

• 作者: 叶美红 周艳芳 帅心涛 邓宇斌 陈晓爱
• 来源期刊: 生物医学工程学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 聚乙烯亚胺 正交设计 转染效率 肝癌细胞
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 104-109
• 页数: 6页
• 分类号: R944
• 语种: 中文

摘要

研制无毒、高转染效率的聚乙烯亚胺(PE I)阳离子纳米粒, Zeta粒度仪、紫外可见光谱表征纳米粒,琼脂凝胶电泳阻滞实验分析报告基因质粒 pEGFP-N1与 PEI及聚乙二醇(PEG)修饰后PEI的复合能力及抗DNAseI酶降解能力,MTT检测纳米粒的细胞毒性,体外转染试验及流式细胞仪评价纳米粒的体外转染活性.以pEGFP-N1质粒与PEI阳离子纳米粒的电荷比(N /P)、PEG与PEI 的接枝比例和质粒转染剂量为条件,转染效率为指标,正交设计法优化pEGFP-N1/ PEI-PE G阳离子纳米粒介导的肝癌细胞基因转染效率.结果显示,PEG修饰后的PEI纳米粒对肝癌细胞毒性较小,粒径及电位较稳定,对质粒有较好的复合能力和抵制DNAseI酶降解能力;pEGF P-N1/PEI的N /P比为40∶1、基因质粒剂量为每孔6μg时,纳米粒复合物的转染效率最高为91%. PEG修饰后的PEI是一种高效、无毒的非病毒载体,能有效将基因转染入肝癌细胞,优化实验条件可提高转染效率.